Xylene Cyanol FF  (货号:B27031)

Xylene Cyanol FF 能够在不同聚丙烯酰胺凝胶电泳示踪 DNA。操作如下：
1.用于变性凝胶。
（1）配制凝胶：10% 的丙烯酰胺 (19:1，丙烯酰胺：双丙烯酰胺)，以及 8.3 M urea。使用条件为 55 ℃。
（2）配制电泳缓冲液：89 mM Tris，HCl，pH 8.0，89 mM 硼酸，2 mM EDTA (TBE)。
（3）配制上样缓冲液：10 mM NaOH，1 mM EDTA，以及 0.1% Xylene Cyanol FF。
（4）凝胶在 IBI 型号 STS 45 电泳装置上以 70 W (50 V/cm，恒定功率) 运行，或在 Hoefer SE 600 电泳装置上以 60 °C (31 V/cm，恒定电压) 运行。
（5）将凝胶置于 Whatman 3MM 纸上干燥并在 X 射线胶片上曝光。曝光时间长达 15 小时。 2.用于变性凝胶。
（1）配制凝胶：含有 8% 的丙烯酰胺 (19:1，丙烯酰胺：双丙烯酰胺)。
（2）配制 DNA 悬液：含有 40 mM TrisβHCl，pH 8.0、20 mM 乙酸、2 mM EDTA 和 12.5 mM 乙酸镁 (TAEMg)。
（3）煮沸 DNA 悬液并缓慢冷却至 16 °C。
（4）配制染色液：含有 TAEMg、50% 甘油、0.02% 溴酚蓝和 0.02% Xylene Cyanol FF。用该染色液将样品调至 10 µL 的最终体积。
（5）凝胶在 Hoefer SE-600 凝胶电泳装置上以 11 V/cm 的电压在 16 °C 下运行，并暴露于 X 射线胶片长达 15 小时或用 Stainsall (HY-D0987) 染料染色。

The accuracy of these methods have not been independently confirmed. They are for reference only.